大肠埃希菌检查法

2010版药典规定

大肠埃希菌检查法

Escherichia Coli Test Method

1.目的

建立大肠埃希菌检查法的标准操作程序。

2.范围

适用于大肠埃希菌检查的操作。

3.责任者

QC化验员。

4.程序:

4.1.简述

4.1.1. 大肠埃希菌(Escherichia coli)即大肠埃希菌,为肠埃希菌科埃希菌属

的模式种。埃希菌属除大肠埃希菌外,新近发现有非脱羧埃希氏菌等5个种。大

肠埃希菌是人和温血动物肠道内的栖居菌,随粪便排出体外。在药品中检出大肠

埃希菌,表明该样品受到人和温血动物的粪便污染,即可能污染肠道病原体。大

肠埃希菌除普通大肠埃希菌外尚有致病性大肠埃希菌,可引起婴幼儿、成人爆发

性腹泻。为保证人体健康,口服药品必须检查大肠埃希菌。

4.1.2. 用4-甲基伞形酮葡糖苷酸(4-Methylumbelliferyl-β

-D-glucuronide,MUG)和靛基质(Indole)试验检查大肠埃希菌是一项新技术,其

检验步骤为:增菌培养后,转种MUG-蛋白胨培养基培养,多数情况下不需要从

混合菌中分离单个菌,如MUG、Indole试验为阳性或阴性即可报告结果。

4.1.3. 原理:利用目标菌限定酶作用的底物的水解产物,产生颜色或荧光反应

作为指示系统来鉴定目标菌。

实验证明,96%的大肠埃希菌含β-葡糖苷酸酶(β-glucuronidase,GUD),

约10%的沙门菌属一些菌种也含有此酶。MUG被GUD水解,产生荧光,由于荧光

反应的敏感度较颜色反应强千万倍,易于观察,没有主观性,因而用MUG鉴定大

肠埃希菌已被广泛应用于临床、食品、饮水、污水等的检测。单一的MUG鉴别大

肠埃希菌其漏检率达6%,鉴于98%的大肠埃希菌其靛基质试验为阳性,故将

MUG与靛基质试验结合,比单用MUG可提高大肠埃希菌的检出率。如MUG与Indole

试验的反应不一致时,则需将供试液的增菌培养物用EMB琼脂平板分离培养、革

兰染色、镜检及生化试验鉴别。该法理论上可使大肠埃希菌的检出率达98%。

如仅用IMViC生化试验来鉴别大肠埃希菌属中的大肠埃希菌,其结果是含混的。

4.2.仪器、设备及用具

4.2.1. 无菌室

4.2.2. 净化工作台

4.2.3. 培养箱(36±1℃)

4.2.4. 高压蒸汽灭菌器

4.2.5. 显微镜(1500X)

Word文档免费下载Word文档免费下载:大肠埃希菌检查法 (共9页,当前第1页)

你可能喜欢

  • 评估报告
  • 培养基适用性检查记录
  • 铜绿假单胞菌
  • 无菌检验操作规程
  • 大肠埃希氏菌
  • 微生物限度检查验证
  • 磷酸盐缓冲液
  • 大肠杆菌

大肠埃希菌检查法相关文档

最新文档

返回顶部