抗氧化剂α-硫辛酸对2型糖尿病大鼠肾脏的保护作用

2型糖尿病模型Goto Kakisaki大鼠12周出现尿蛋白排泄率增高,肾脏氧化应激指标异常,肾组织NF-κB、p22phox和p47phox表达上调,肾组织形态学改变明显,肾组织丙二醛与p22phox、p47phox和NF-κB呈显著正相关,而隔日腹腔内注射1次硫辛酸(35mg/kg)治疗可减轻上述异常变化,表明硫辛酸通过抗氧化作用而对这一类型糖尿病大鼠肾脏具有保护效应。

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中华内分泌代谢杂志 20 0 7年 1 O月第 2 3卷第 5期

C i n or o Me b c br 0 7 o 3. o hnJE dci l t .O t e 0 .V l n a o 2 2 N .5

基础研究

抗氧化剂 O硫辛酸对 2型糖尿病大鼠肾脏的保护作用/ - 冯波颜新凤徐雷钱巧慧王华薛俊丽

【要】 2型糖尿病模型 G tK k ai提 o ai k大鼠 l周出现尿蛋白排泄率增高, o s 2肾脏氧化应激指标异常, 肾组织 N—B、2 p o和 p7 h x F K p2 h x 4 p o表达上调,肾组织形态学改变明显,肾组织丙二醛与 p2 h xp 7 hx和 2 p o、4 po

N -B呈显著正相关, FK而隔日腹腔内注射 1次硫辛酸 (5m,k ) 3 e g治疗可减轻上述异常变化,/表明硫辛酸通 过抗氧化作用而对这一类型糖尿病大鼠肾脏具有保护效应。

【关键词】硫辛酸;糖尿病肾病;氧化应激

P o e t e e e t o n i xd tv H o c a i n k d e si y e 2 d a e i a s r t c i f c f a t i a i e m p i cd o i n y n t p i b t r t v o c

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【u S mmay T eew r s nf at nraei u n r e xrt n asdm lni dh d MD r】 h r ee i icn ices r epo i ece o,ri aoda eye( A) g i n i tn i e l lv la d e p e s n f NF K e e n x r s i s o - B, p 2 h x a d p 7 h x i e a t s e a d s i c n d c e s i e u e o 2 p o n 4 p o n rn l i u, n i f a t e rae n rd c d s n g i gu ah o e,s p rx d i t e,vtmi n e e s i y e 2 d a

e i G t - k sk as a tr 1 e k . lt t in u e o ie d s a mus i a n C a d E l v l n tp ib t o o Ka ia ir t f 2 w e s c e T e e w so vo sh s mo p oo i h n e i h i n y .AU te a o ei d c swee i r v d b n r p rtn a h r a b iu it r h lgc c a g n t e kd e s o v n ie r mp o e y i t e i e l h b a o

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【 e od】 L o i; i ec ehoa i; x av r s K yw rs i ia d Da t pr te O i te t s p cc b in ph s d i se ( hnJE dc nl tb 20,3 4 04 1 C i nor o Me, 0 7 2:5 - ) i a 5

氧化应激状态是糖尿病慢性并发症发生发展的“同土共壤”,…改善氧化应激状态可能成为防治糖尿病肾病的有效措

3制作 2 . m肾脏石蜡切片, E染色观察肾组织的病理形 H态学改变, Mo cI g dacd3 1图像分析系统,用 t maeA v e . i n测量系 膜区面积 ( 、 S )肾小球面积(。。 S )

施 j。本研究探索氧化应激在糖尿病肾病发病机制中的作用, 并评估抗氧化剂仅硫辛酸对 2型糖尿病大鼠肾脏的保护效应。一 一

4统计学处理: .应用 S S 1.件处理数据,有数据以 P S3 0软所 ±表示, s组间比较采用单因素 A O A分析,内两两比较采 N V组用 S K检验。 N 二、果

材料和方法

14只健康雄性 Wia大鼠和 1 . sr t 0只雄性自发性 2型糖尿 病模型 G t-a i k( K)鼠, oo ks iG大 K a后者随机分为 G K鼠对照组和 G K鼠仅硫辛酸治疗组 (天 1次腹腔注射仅硫辛酸 3一隔 - 5

G K对照组血糖水平为 ( . 4 0 mm lL和 G 8 7± . ) o/ K治疗组血糖水平为( . 2 1 m o L两组之间的差异无统计学意 94 4 . ) m l, -/

m/g各 5只。各组均予高脂饮食 (础饲料 8%、油 sk)基 0猪 1%、 0白砂糖 1% ) 2周。 0 1

义,但均较正常组 ( . 0 4 m lL明显升高 ( P< 4 24 . )m o -/均 0 0 ) K对照组尿蛋白排泄率 (0 141 . )/2 . 5。G 2 . 4 8 ms 4 h较正 -常组 ( . 13 m 2 2 34 . ) s 4h明显升高 ( 0 0 ) G -/ P< . 5, K治疗组 ( . 97 - . ) s 4h的尿蛋白排泄率降低, 45 2 m 2 /与正常对照组和 G K对 照组比较差异无统计学意义。

2试验结束时收集 2 标本,定尿蛋白排泄率。此 . 4 h尿测 外,肾去髓质,取制成 1%匀浆,心取上清液, 0离化学比色法测定维生素 C还原型谷胱甘肽 ( S、、 G H)维生素 E、氧化物酶超 (O ) S D和丙二醛 ( A)南京建成生物工程研究所试剂盒 ) MD (。

实时定量 R -C R tr e e30 ehmeP R仪 ) TP R( oo- n 00R a i C G分析肾组 织 N D H氧化酶亚基 p 2 hx和 p 7 hx N -B的 m N A P 2po 4 p o、 FK R A表达。引物如下: - t:’ C G A G C A A A T C 3,’ Ba i 5- T T C C A C C G G - 5- cn C - 删 A C-’ 2 p o:5' TC 3;p 2 h x - GGAC Tr AC GC C G- CAGTGGTA -, 5’GGACAGCAGTAAGTGGAGGACA-; p 3 - 3’ 47- ph x: - o 5'ATGGGACTGCCCGTGAAGAT-, - 3 5'GGATGATGGGAC-

在肾脏皮质,与正常对照组比较, K对照组 MD G A含量增 加, S S D、 G H、O维生素 E、维生素 C含量减少; G与 K对照组比较, K治疗组 MD G A含量减少,

S S D、 G H、 O维生素 E维生素 C、

含量升高,差异均有统计学意义( 0 0 P< . 5或 P< . 1表 1。 0 0, ) 与正常对照组比较, K对照组肾组织 N -B、2 p o G F K p 2 hx和

p7 hx的表达均明显升高, G 4po而 K治疗组各指标均降低 (表 2。 )

CC GA G-’ GT T 3:NF K - B:5 - TG GGGA GC C AT 3,5 - 'AC CC TG Tr T -’ CTGGATGCGCTGGCTAATGG-。 3’

相关分析显示,4h尿蛋白排泄率与 S D(=一 .3, 2 O r 0 57P < .5、 S r 0 83 P< . 1和维生素 E r一 .4, 0 0 ) G H(=一 .2, 0 0 ) (= 0 6 5

基金项目:7 9 3计划资助项目(0 6 B 09 0 2 0 C 53 0 )作者单位: 0 2 2 10上海, 0同济大学附属东方医院内分泌科

P< . 5呈显著负相关。肾组织 MD 00 ) A与 p 2 hx r .6, 2 po (=0 6 P < . 1、4 p o (= .6, 0 0 ) N -B (= . 1 0 0 ) p7 h x r 0 6 5 P< . 1和 F K r 06,P 4

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