乳杆菌鼠李糖亚种冻干保护剂的研究

ｗｖｃｗ．ｃｈｉｎａｄａｉｒｖ．ｎｅｔ

ｒｐｇｙ＠ｃｈｉｎａｊｏｕｒｎａｌ．ｎｅｔ．ｃｎ

中国乳品工业ｄ

干酪乳杆菌鼠李糖亚种冻干保护剂的研究

邢蕾，吴晖，刘冬梅，石英

（华南理工大学轻工与食品学院，广州５１０６４０）

摘要：以存活率为指标，绅干酪乳杆菌鼠李糖亚种（匕咖６积‰ｃａｓｅｉｓｕｂｓｐ．ｒｈａｍｎｏｓｕｓ７１９）Ｗ１茵体进行冻干保护研究，通过优化冻干保护

荆，以降低冻干过程中的细胞损伤。结果表明，７种保护剂中，保护效果由大到小依次为海藻糖、脱脂奶粉、蔗糖、甘油、可溶性淀粉、硫酸

锰、抗坏血酸；复配则以质量分数１０％海藻糖＋１０％脱脂奶粉的组合为最佳．其茵体存活率达１００％，冻干茵粉活茵数达１０“ｇ－１。关键词：干酪乳杆菌，冷冻干燥，冻干保护荆

中图分类号：Ｑ９３．３３６

文献标识码：Ａ文章编号：１００１－２２３０（２００９）１１－００１５－０３

Ｓｔｕｄｙ

ｏｆｃｒｙｏｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅａｇｅｎｔｓ

ｄｕｒｉｎｇｆｒｅｅｚｅ—ｄｒｙｉｎｇＬａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ

ｃａｓｅｉ

ｓｕｂｓｐ．

ｒｈａｍｎｏｓｕｓ７１９

ＸＩＮＧＬｅｉ，ＷＵＨｕｉ，ＬＩＵＤｏｎｇ—ｍｅｉ，ＳＨＩＹｉｎｇ

（ＣｏｌｌｅｇｅｏｆＬｉｇｈｔＩｎｄｕｓｔｒｙａｎｄＦｏｏｄＳｃｉｅｎｃｅ，ＳＣＵＴ，Ｇｕａｎｇｚｈｏｕ５１０６４０，Ｃｈｉｎａ）

Ａｂｓｔｒａｃｔ：ＩｎｏｒｄｅｒｔｏｍｉｎｉｍｉｚｅｔｈｅｄａｍａｇｅｏｆｃｅｌｌｏｆＬａａｏｂａｄｌｌｕｓｃａｓｅｉｓｕｂｓｐ．ｒｈａｍｎｏｓｕｓ７１９ｄｕｒｉｎｇｆｒｅｅｚｅ—ｄｒｙｉｎｇ，ｔｈｉｓｓｎＪｄｙＷｉｇｕｎｄｅｒｔａｋｅｎｃｈｏｏｓｅｐｒｏｐｅｒｃｒｙｏｐｒｏｔｅｃｔａｎｃｅａｎｄ

ｔＯ

ｏｐｔｉｍｉｚｅｔｈｅｃｒｙｏｐｒｏｔｅｃｔａｎｃｅ．Ｔｈｅｅｆｆｅｃｔｓｏｆｔｈｅｃｒｙｏｐｒｏｔｅｃｔａｎｃｅｓ

ｔｅｓｔ

０１１

ｔｈｅｓｕｒｖｉｖａｌ

ｒａｔｅ

ｏｆｔｈｉｓｓｕ＇ａｉｎｗｅｒｅｉｎ－

ｖｅｓｔｉｇａｔｅｄ．Ｔｈｅｒｅｓｕｌｔｏｆｓｉｎｇｌｅ—ｆａｃｔｏｒＳｕｃｒｏｓｅ，Ｇｌｙｃｅｒｏｌ，Ｓｏｌｕｂｌｅ

ｓｈｏｗｅｄ

ｔｈａｔ，ｔｈｅｅｆｆｅｃｔｏｆｓｅｖｅｎｃｒｙｏｐｒｏｔｅｃｔａｎｃｅｓｆｏｌｌｏｗｓｔｈｅｏｒｄｅｒ越ｔｈａｔ：Ｄ—Ｔｒｅｈａｌｏｓｅ，ＳｋｉｍＭｉｌｌ

ｒａｃｅ

ｓｔａｒｃｈ，ＭｎＳ０４，Ｖｃ．Ｔｈｅｂｅｓｔｃｏｍｐｏｓｉｔｉｏｎｗａｓ：１０％Ｄ—Ｔｒｅｈａｌｏｓｅ＋１０％ＳｋｉｍＭｉｌｋ，ｉｎｗｈｉｃｈｔｈｅｓｕｒｖｉｖａｌ

ｏｆ

ｔｈｅｂａｃｔｅｒｉａｗａｓ１００％ａｎｄｔｈｅａｍｏｕｎｔｏｆｌｉｖｅｂａｃｔｅｒｉａｉｎｆｒｅｅｚｅ—ｄｒｉｅｄｐｏｗｅｒＷａＳ１０”ｇ～．

Ｋｅｙｗｏｒｄｓ：Ｌａｃｗｂａｃｉｌｌｕｓｃａｓｄ；ｆｒｅｅｚｅ—ｄｒｙ；ｃｒｙｏｐｒｏｔｅｃｔａｎｃｅ

０

引言

１

实验

干酪乳杆菌以其对宿主营养、免疫、防病等显著的益生功效。近年来成为研究、开发、生产的焦点【一。冷冻干燥是目前制备和保藏其菌粉最有效的方法之一嗍。对于绝大多数细菌的冷冻干燥，成功的关键（存活率高、活存期长）在于保护剂的有效使用研。保护剂可以减轻或防止冷冻干燥或复水对细胞的损害．尽可能保持其原有的生理生化特性和生物活性Ｐｍ。有研究表明．单一保护剂并不足以使菌体抵抗外界恶劣的条件ＩｌＩｌ，因此一般是几种按一定比例混合使用。

根据干酪乳杆菌的特点．本文采取单因素实验结合复配实验的方法．选择常见的７种保护剂．通过活菌数的检测．计算冻干后的菌体存活率．评价各保护剂配方对菌体冻干损伤的保护效果。从而选择最佳的保

护剂配比。

收稿日期：２００９—０３－２６

基金项目：广东省自然科学基金（８４５１０６４１０１０００２９１）。。新世纪优秀人才

计划”资助项目（ＮＣＥＦ０６—０７４６）。

作者简介：邢蕾（１９８５一），女，硕士，主要从事食品微生物的相关研究。通讯作者：刘冬梅

１．１材料与设备

菌种：干酪乳杆菌鼠李糖亚种（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓｃａｓｅｉｓｕｂ—

ｓｐ．ｒｈａｍｎｏ￥“ｓ７１９．Ｌ，ＣＲ７１９）Ｊ叭菌株干酪乳杆菌鼠李糖哑

种（Ｌａａｏｂａｃｉｌｌｕｓ化而得。

ｃａｓｅｉ

ｓｕｂｓｐ．砌４卅加饿ｓ６０１３．ＬＣｆＬ６０１３）珊Ｉ

ＭＲｓ培养基：蛋白胨１０ｇ，葡萄糖２０ｇ，酵母浸膏５ｇ，

乙酸钠５ｇ，柠檬酸氢三铵２ｇ，牛肉膏１０ｇ，Ｔｗｅｅｎ～８０为１ｍＬ，Ｋ２ＨＰ０４为２ｇ，ＭｎＳＯ，．４Ｈ２０为０．１２５ｇ（同体培养基需加入质鼋分数为１．５％琼脂粉），加蒸馏水至１０００ｍＬ．调ｐＨ值至７．０．于１２１℃灭菌２０ｎ＇ｆｉｎ。液体培养基用于保存菌种与活化传代．固体培养基用于活菌计数。

化学试剂：抗坏血酸钠（生化试剂），可溶性淀粉（生化试剂），蔗糖（分析纯），Ｄ一海藻糖（生化试剂），脱脂奶粉（进口）。甘油，硫酸锰（分析纯）。

仪器设备：８００－Ｂ型微生物离心机，ＦＡ２００４Ｂ型电子天平，ｐＨＳ一３Ｃ型精密ｐＨ计，ｊ－２型菌落计数器，ＬＲＨ一１５０—Ｈ型恒温恒湿培养箱，ＸＷ－－８０Ａ型旋涡混合器．ＡＬＰＨＡｌ—２型真空冷冻干燥机。

历万ｉ万丽面磊乙两Ｉ罗

万方数据