凝结芽孢杆菌T50产芽孢条件优化的研究

研究报告

中国酿造

2009年第7期总第208期

·93·

凝结芽孢杆菌T50产芽孢条件优化的研究

程1,周长海1*,于红梅2,刘

婷1,乌日汗3

(1.吉林大学生物与农业工程学院,吉林长春130022;2.长春职业技术学院食品与生物技术分院,

吉林长春130033;3.内蒙古民族大学生命科学学院,内蒙古通辽028000)

最终确定了摇瓶最佳培养条件:培养基组成摘要:通过单因素及正交试验对凝结芽孢杆菌T50的产芽孢条件进行了优化,(质量分数)为蛋白胨2%,葡萄糖0.2%,酵母浸粉0.3%,麸皮5%;培养基初始pH7.0,接种量2%,培养时间3d。最终使芽孢形成率达到94.3%。

关键词:凝结芽孢杆菌;芽孢;培养条件;正交试验;优化中图分类号:Q93-335

文献标识码:A

文章编号:0254-5071(2009)07-0093-03

Optimizingspore-formingconditionsofBacilluscoagulanT50

LUCheng1,ZHOUChanghai1*,YUHongmei2,LIUTing1,WURihan3

(1.SchoolofBiologicalandAgriculturalEngineering,JilinUniversity,Changchun130022,China;

2.BranchInstituteofFoodandBiotechnology,ChangchunOccupationalInstituteofTechnology,Changchun130033,China;

3.CollegeofLifeSciences,InnerMongoliaUniversityfortheNationalities,Tongliao028043,China)

Abstract:Thesinglefactorandorthogonaltestswerecarriedouttooptimizethespore-formingconditionsofBacilluscoagulanT50.Theoptimalshake-flaskcultureconditionswereconfirmedasfollows:themediumconsistedof2%peptone,0.2%glucose,0.3%yeastextractand5%wheatbran(massfraction),themediuminitialpHwas7.0,theinoculumwas2%andthefermentationtimewas3d.Underaboveconditions,thesporulationratereached94.3%.

Keywords:Bacilluscoagulan;spore;cultureconditions;orthogonaltest;optimize

优良的微生物制剂必须要有一定的热稳定性、耐酸耐胆盐性并可长期储藏不失活。普通菌体耐受性差,储藏期短,易死亡,并不是理想的微生物制剂。芽孢(endospore、spore)是产芽孢菌在生长发育后期在细胞内形成的圆形或椭圆形、厚壁、含水量低、抗逆性强的休眠构造。芽孢没有新陈代谢,能经受多种环境伤害,包括热、紫外线、多种溶剂、酸、碱等[2-3],是较为理想的微生物制剂。所以如何获得大量益生菌芽孢成为其能否作为微生物添加剂的关键。

本试验通过单因素及正交试验对凝结芽孢杆菌T50的产芽孢条件进行了优化,最终确定了摇瓶最佳培养条件。1材料与方法1.1试验菌株

收稿日期:2009-03-09

基金项目:吉大国际合作(3L106F982466)

吉林大学生物与农业工程学院发酵实验室保藏的凝结芽孢杆菌T50。

1.2培养基

种子培养基、固体培养基(MRS培养基):蛋白胨1%,牛肉膏l%,酵母粉0.5%,葡萄糖2%,吐温-801mL/L,磷酸氢二钾0.2%,醋酸钠0.2%,柠檬酸二铵0.2%,硫酸镁

硫酸锰0.005%,0.02%,pH6.8。基础培养基:蛋白胨2%,葡萄糖0.2%,酵母粉0.2%,麸皮水代替蒸馏水。麸皮水的制作:5%的麸皮(40目过筛),微火煮lh,滤液不足时用蒸馏水补齐。3层纱布过滤,

摇瓶发酵培养基:根据试验设计改变基础培养基成分含量。

!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!![5]HSEUYC,CHANGWC,HSEUYT,etal.Antioxidantpropertiesof参考文献:

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),男,吉林人,硕士研究生,研究方向为微生物工程,周长海*,教授,通讯作者。作者简介:路程(1985-

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