HotMaster Taq DNA Polymerase产品使用说明书

HotMaster Taq

DNA Polymerase

使 用 说 明 书

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储存:-20 ℃ 保存。浓度: 5U/µl 制品说明:HotMaster Taq DNA polymerase 采用了国际上最新专利的合成亲和性配体技术,该配体可以以

一种温度依赖性的方式来可逆性地阻断酶的活性。该酶与一般Hot-start 酶不同之处在于,一般的Hot-start 酶只在第一步温度升高之前封闭酶的活性,而HotMaster Taq DNA 聚合酶利用抑制性配体通过温度调节方式封闭HotMasterTaq DNA 聚合酶的底物结合位点,温度低于40℃时,形成非活性的酶-抑制剂复合物,当温度升高至引物特异性的退火温度时,结合平衡向模板-特异性引物复合物形成方向移动,因此最大限度的减少PCR 扩增全程中的非特异性扩增产物产生,大大提高了PCR 反应的精确性。PCR 产物3’端为A,可直接用TA 载体克隆。

活性单位:1 单位(U)HotMaster Taq DNA Polymerase 活性定义为在74℃、30

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分钟内,以活性化的大马

哈鱼精子DNA作为模板引物,将10 nmol脱氧核苷酸掺入到酸不溶物质所需的酶量。

质量控制:SDS-PAGE 检测纯度大于99%,经检测无外源核酸酶活性;PCR方法检测无宿主残余DNA,能有效

地扩增人基因组中的单拷贝基因;室温存放一周,无明显活性改变。

产品特点:快速,不需要额外加热激活。

持续退火时酶活性控制,达到全程热启动效果。

PCR 过程无变性抗体等蛋白污染。

适用范围:一般用于高灵敏度和有较强背景的基因组扩增(如基因组中某个特定基因位点或外源病原体检

测)、DNA序列测定、Multiplex PCR、TA 克隆等。

反应举例:以下举例为常规PCR 反应系统,仅供参考。实际反应条件因模板、引物等的结构不同而各异,

需根据模板、目的片段的大小、碱基序列和引物长短等具体情况,设定最佳反应条件。10× HotMaster Taq Buffer 中含有Mg2+,配有浓度为15 mM MgCl2。实际PCR 反应可因模板等的不同酌情向反应体系中添加适量的Mg2+,设置最佳的反应体系。

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