大鼠骨髓间充质干细胞体外培养和鉴定

目的探讨大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)体外分离培养方法及其生物学特性。方法采用全骨髓贴壁培养法获得大鼠骨髓间充质干细胞,取第3代骨髓间充质干细胞,通过成骨、成脂肪诱导分化以及流式细胞仪分析其表面标记(CD29、CD34、CD45、CD90)等鉴定BMSCs特征。结果全骨髓贴壁培养法获得的BMSCs,原代和传代培养具有活跃的增殖能力;BMSCs经诱导后可分别向成骨、成脂转化;流式分析表面

西部 医学 21 0 1年 1 2月 第 2 3卷 第 1 2期

Me Wet hn , ee e 2 1 , 12 , . 2 dJ s ia D cmb r 0 1Vo.3 No 1 C

23 03

大 鼠骨 髓 间充质 干 细胞 体 外培 养和 鉴 定 * 田诗 政 , 志宏 , 国华 , 杨 冯 唐俊 明 ,陆 华 ( 北 医药 学 院附 属 人 民 医 院烧 伤 整 形 科 临 床 医学 研 究 所 , 北 十 堰 42 0 ) 湖 湖 4 0 0

【 要】 目的 摘

探 讨 大 鼠骨 髓 间充 质 干 细胞 ( MS s 体 外 分 离 培 养 方 法及 其 生 物 学特 性 。 方 法 采 用 全 骨 髓 贴 B C)

壁 培 养 法 获得 大 鼠 骨髓 间 充 质 干 细胞 , 第 3 骨 髓 间 充质 干 细胞 , 过 成 骨 、 脂 肪 诱 导 分化 以及 流 式 细胞 仪 分 析 其 取 代 通 成

表 面标记( D 9 C 4 C 4 、 D 0 等 鉴定 B C 特征 。结果 全骨髓 贴壁培养 法获得的 B C , C 2 、 D3 、 D 5 C 9 ) MS s MS s 原代和 传代 培养 具 有 活 跃 的增 殖 能 力 ; MS s 诱 导 后 可 分 别 向成 骨 、 脂 转 化 ; 式 分 析 表 面 标 志 分 子 高 表 达 C 9 ( 6 5 ) C 2 B C 经 成 流 D 0 9 . 、 D 9

(23 , 9 . %) 低表 达 C 3 (. 9 )C 4 (. 1 。结论 D 4 0 8 、 D 5 14 %) B C MS S具 有 潜 在 的 多向 分 化 能 力 。

全骨髓贴壁培 养法可有效地分 离和 扩增 B C , 离培养 的 MS s 分

【 关键 词】 骨 髓 问 充质 干 细胞 ;培 养 ; 化 分 【 图分 类 号】 R 3 ; 1 中 -3 Q 83 【 献标 识 码】 A 文 【 文章 编 号】 D I1 .9 9ji n1 7—5 12 1. 20 3 O :0 36 /. s. 623 1.0 1 1.0 s

Culu e a d ntfc to fr tb ne m a r w。 e i e e e c m a t m e l t r nd i e i i a i n o a o r o d rv d m s n hy ls e c ls TI AN hiz e S - h ng,YANG - ng,FENG o hu e Zhiho Gu - a, tal

( p rme t f B r s n l s cS r e y,I s t t o l ia d c e R n nHo p l l De a t n u n d P a t u g r o a i n t ue f C i c l i n Me ii , e mi s i , n a

Hue U ies yo d c e S ia 4 0 0 Hu e) bi nvri fMe ii , hy n4 2 0 , bi t n

[ b t c] Obet e T x lr h ilg a c aa tr t s a d c l r fb n r w d r e sn h ma A sr t a jci o e po et eboo i l h rcei i n ut e o o e mar — ei d mee c y l v c sc u o v s e c l BM S ) fr t n v to M e h d Th t m el s( Cs o a s i ir . t o s eBMS f a swe ec lu e y t ewh l o e ma r w d e e c u — Cso t r u t rd b h o e b n ro a h r n e c l r t r .BM S s i e tf d t r u h mu t d f r n ito n u f c r e s a ( D2 , ue Cswa d n ii h o g l — 讧 e e tai n a d s r a e ma k r a s y C 9 CD3 C 5 CD9 ) Reu t e i 4, D4 , O . sl s BM S r b an d b h o e b n r o a h r n e c lu e cSwe eo t i e y t ewh l o ema r w d e e c u t r .Th M S u t r d b rma y c lia i n a d s b eB Csc lu e y p i r u t to n u — v

c lia in h d g o e r d c i e a t iis M S o l e i d c d i t se b a t n io l s s Th e u t fF o u t to a o d r p o u tv c i t .B v v e Cs c u d b n u e n o o t o ls s a d l b a t . e r s lso l w p

C t mer h we a e9 . B C x rs e D 0 9 . c l x r se D 9 0 8 % c l x rs e D 4 yo tys o dt t h 5 5 h t MS se p es dC 9 , 2 3 e s p es dC 2 , . 9 le el e p e sd C 3 s a d14 n . 1 c lse p e s d CD4 . Co c u in BM S s c n b e a a e n r l e a e fe tv l y t e wh l o e e l x r s e 5 n lso C a e s p r t d a d p oi r t d e f c ie y b h o e b n f

ma r w d e e c u t r . e c lu e ro a h r n e c lu e Th u t r d BM S s h v h a a it fmu td r c in l i e e t t n i i o C a e t e c p b l y o 1 ie t a f r n i i n v t . i i o d f ao r

[ ywo d] B n ro d rv dme e c y lse c l ;Cutr ;Di e e t t n Ke r s o ema r w- eie s n h ma tm el s lu e f rn i i f ao

骨 髓 间充 质干 细胞 ( o emarw d r e sn b n ro ei dmee — v

重 (0 ) 4 ±5 g。动物 在屏 障系统 环境下 , 用专 用 饲料 和 灭 菌水分 笼饲养 。 1 1 2 实验 试 剂 . . D M 培 养 基 ( 国 Gie l ME 美 b o 公 司) 胎牛 血清 (ftl o iesrm, B 杭 州 四季 青 ; ea vn eu F S, b

c y ltm el, MS s 是 中胚 层 来 源 的具 有 多 向 h mase cl B C ) s

分 化 潜 能 的干 细 胞 , 取方 法 简单 , 获 体外 培养 条 件 要 求 不 高 , 续 增 殖 能 力 强 , 内移 植无 或 具 有 弱 排 异 持 体 反 应 , 于被外 源基 因转 染并 稳 定 表 达 , 细胞 工 程 、 易 在 组 织工 程 中具 有广 泛 应用 前 景 , 是 骨髓 中只 含有 少 但

生 物 工 程 有 限 公 司 ) 胰 酶 ( Tr pi , a g n ; ; ( ys Sno ) n C 2 、 D3 、 D 5 C 0 美 国 e isi e D 9 C 4 C 4 、 D9 ( B oce e公 司) 地 n ;

量 B Cs在 骨髓 的有 核 细胞 中所 占的 比例 约 为 1 MS , / 1 0 0 , 以满 足 组 织 工 程 和 细 胞 治 疗 的需 要 , 易 0 00 难 且

塞 米松 、一 B磷酸甘 油 、 生 素 C、 岛 素 、 ,一 脒一一 维 胰 4 6联 2苯 基 吲哚 ( , -i dn -一 h n ln oe i c tt , 4 6da io2p e y— d ld— eae D A mi i a

与其 他 细胞 相 混 杂 , 索 理 想 的 B C 探 MS s体 外 培 养 扩 增 方法 和鉴 定 方法具 有 重要 的理论 意义 和现 实意义 。 1 材 料与 方法 1 1 材 料 .

P I , 素红 ( ima , 红 O( ima 。 )茜 Sg ) 油 Sg )

113 主要仪 器 ..

C 细胞培 养箱 (ceti)超净 O。 Si ic , nf

工作 台( ar , 温 高 速 离 心 机 ( r e s , 置 相 Nu i) 低 Heau ) 倒 差显 微镜 ( k n , Nio ) 图像 分 析 系统 ( 国 Me i C b r 美 da y e— 选 取 幼年 S F级 S P D大 鼠 6 , 只 体 n t s 司) ei 公 c 。 12 方 法 .

1 1 1 实验 动 物 ..

基 金 项 目 l 北 省 教 育 厅 重 点 项 目( 0 0 1 7 湖 D2 1 2 0 )

1 2 1 B C 的培 养 . . MS s

采用 全 骨髓 法 : 给予 大 鼠腹

大鼠骨髓间充质干细胞体外培养和鉴定

Word文档免费下载Word文档免费下载:大鼠骨髓间充质干细胞体外培养和鉴定 (共1页,当前第1页)

大鼠骨髓间充质干细胞体外培养和鉴定相关文档

最新文档

返回顶部