2株鱼源芽孢杆菌的生物学特性研究

体外研究了2株分离自斜带石斑鱼肠道的芽孢杆菌(DE5和SE5)的生长曲线、对模拟胃肠道环境的耐受能力及对潜在致病菌的抑制效果。结果显示,SE5生长速度明显快于DE5,SE5培养4 h进入对数生长期,而DE5培养8 h进入对数生长期。人工胃液耐受试验表明,DE5对人工胃液(不同pH值、胃蛋白酶)的耐受能力较强,pH 2.0的人工胃液处理4 h,其活菌数超过10^4cfu/ml,pH 3.0和4.0的人工胃液对DE5的

第 2 9卷第 9期 21 0 0年 9月

产科学

Vo . 9 No 9 12 . S p 2 0 e . 01

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2株鱼源芽孢杆菌的生物学特性研究 马如龙,红玲孙云章叶继丹张春晓林文燕杨,,,, (1 .集美大学福建省高校水产科学技术与食品安全重点实验室,建福厦门 3 1 2; 6 0 1 2 .南京农业大学消化道微生物实验室,江苏南京 2 0 9 1 0 5) 摘要:外研究了 2株分离自斜带石斑鱼肠道的芽孢杆菌 ( E体 D 5和 S 5的生长曲线、模拟胃肠道 E)对环境的耐受能力及对潜在致病菌的抑制效果。结果显示,E S 5生长速度明显快于 D 5 S 5培养 4h E,E 进 入对数生长期, D 5养 8h进入对数生长期。人工胃液耐受试验表明, E而 E培 D 5对人工胃液 (同 p 不 H值、蛋白酶 )耐受能力较强, H 2 0的人工胃液处理 4h其活菌数超过 1 f/ . H 3 0 4 0胃的 p ., 0 cu m1p .和 .的人工胃液对 D 5的生长几乎没有影响; E对人工胃液的耐受能力相对较差,H . E S5 p 2 0的人工胃液处 理 2h后未检测到活菌, p 3 0和 4 0的人工胃液处理 4 h后 S 5的活菌数超过 1 f/。S 5 但 H . . E 0 cu ml E

和 D 5人工肠液 (同质量分数胆盐、蛋白酶 )有很强的耐受能力,含 0 1~ O 7胆盐的人 E对不胰均经 . .工肠液处理 3h后,株菌的存活数均超过 1 f/, S 5的耐受能力略强于 DE。抑菌试验显示, 2 0 cu ml且 E 5 2芽孢杆菌对多株潜在致病菌具有一定抑制作用。因此,株芽孢杆菌均具有生长速度较快,胃肠株 2对道环境耐受能力强特点,对潜在致病菌具有一定抑制效果,有作为益生菌应用的潜力。且具 关键词:带石斑鱼;孢杆菌;长;受;菌斜芽生耐抑 中图分类号: 971¥ 1 .文献标识码: A文章编号: 0 3 1 1 ( 0 0 0— 5 5 0 1 0— l 1 2 1 ) 90 0— 5

近年来,随着抗菌药物在养殖生产过程中使用带来的诸多负面影响,毒

害、残留的微生态制无无剂正成为当前研究和开发的热点L] 1。益生菌或分 离自健康动物胃肠道,来自养殖环境,过调节或通肠道菌群结构,激动物的免疫功能,进动物的刺促生长和健康]。迄今为止,类益生菌筛选和应鱼用已有报道,但使用效果并不稳定[ 7。其中一个 1-,3 8很重要的原因是许多菌株来自环境或分离自恒温动物,以在鱼类消化道中定殖或定殖时间短,难益生作用发挥有限。因此,一些学者认为理想的益生菌最好来自于动物自身胃肠道[。本实验室在研 g 究不同生长速度斜带石斑鱼 ( p n p l s ood s E ie h u ii e ) c幼鱼的肠道微生物时发现,长速度较快的幼鱼肠生道的优势菌为 2株芽孢杆菌 ( a i u )而生长较 B cl s, l慢的幼鱼肠道内未分离到芽孢杆菌,示这 2株芽提孢杆菌对石斑鱼生长和健康可能具有一定的促进作用,有作为益生菌开发的潜力。本试验初步探具讨了这 2株菌的生长曲线、对模拟胃肠道环境的耐

受能力及对石斑鱼肠道潜在致病菌的抑制能力,为进一步的应用开发提供理论基础。

1材料与方法 1 1材料 .

1 1 1菌株 ..

2株芽孢杆菌 ( E D 5和 S )分离自健康的 E5均

7 0日龄斜带石斑鱼肠道,海水琼脂培养基上生长在 2 4h的菌落形态见表 1由表 1知, E。可 D 5和 S 5 E均为乳白色、透明、半隆起、边缘整齐, E D 5的菌落相对较大。革兰氏染色结果表明, 2株菌均为革兰氏阳性菌,见明显芽孢。经 1 S r NA基因测序可 6 R分析, 5的最相似菌为克劳氏芽孢杆菌 ( . DE B ca si,似度为 8 , E lu i相 ) 9 S 5的最相似菌为短小芽孢杆菌 ( p miu )相似度为 9。抑菌试验所 B. u ls, 9用的 8株潜在致病菌均分离自 7 0日龄斜带石斑鱼消化道。

表 1 DE 5和 S 5的形态特征 E

收稿日期:2 0— 1O;修回日期:2 1 - 1 1 . 0 91一9 0 00—4 基金项目:国家自然科学基金资助项目( 0 0 4 1;建省高校水产科学技术与食品安

全重点实验室基金资助项目 (o 9 l 2; 3606)福 2 o JO )

集美大学科研基金资助项目( Q2 0 0 2 . Z 0 61) 作者简介:马如龙 ( 9 2一 )男,士研究生,究方向:产微生物学;— i:mauo g 3 3 1 3 c r.讯作者:云章 18,硕研水 E mal rln l 1@ 6 . o通 n孙 ( 9 6 )男,教授,士,究方向:产微生物学; - i s n u z a g yh o cr.n 17一,副博研水 E mal u y n h n@ a o. o c.: n

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