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中国公共卫生管理2012年12月第28卷第6期Chin.JofPHM.Dec.2012VoL28No.6

采集的３类食品中，其中熟制米线类制品的蜡样芽孢杆菌检出率最高，检出率为３０．５１％（１８／５９）；其次是盒饭类，检出率１３．１３％（１３／９９）；凉皮类检出率为８％（２／２５）。结果表明，黑龙江省米面制品中存在着一定程度的蜡样芽孢杆菌污染，３类米面制品中蜡样芽孢杆菌总检出率为１８．１３％。检测结果显示，米面制品中米线的蜡样芽孢杆菌污染率最高，且大都是在来自小餐饮摊点的米粉中检出。而蜡样芽孢杆菌又易污染含淀粉较多的米粉。被该菌污染的食品在外观、性状上没有变化，无明显的腐败变质现象，这就降低了人们的警惕性。近几年来曾报道多起由蜡样芽孢杆菌引起的食物中毒。该菌广泛分布于土壤、尘埃等自然界中，污染食品的机会很多。该菌生长繁殖温度范围广，在１６℃～５０℃均可生长繁殖并产生毒素，且在室温２０℃左右具有形成耐热芽孢的特性。通常的食品加热烹调（热冲击）对该菌的芽孢杀

不死，而芽孢却会残存发芽［１］。

为了预防此类菌引起的食物中毒，卫生监督机构应加强对小餐饮店从业人员的卫生知识培训，宣传科学的保存食物方法和良好的卫生习惯。同时，加强对这些小餐饮摊点早餐品种的监督监测，固定摊点，减少其流动性，避免和减少由蜡样芽孢杆菌

通过本文检测结果，了解了黑龙江省引起的食源性疾病的发生。

米面制品中蜡样芽孢杆菌的污染情况，为预警食品安全隐患，为

食品安全监督管理提供了科学依据。

参

考

文

献

［１］ＬａｋｅＲ，ＨｕｄｓｏｎＡ，ＣｒｅｓｓｅｙＰ．Ｒｉｓｋｐｒｏｆｉｌｅ：Ｂａｃｉｌｌｕｓ．ｓｐｐｉｎｒｉｃｅ［Ｒ］．Ｎｅｗ

Ｚｅａｌａｎｄ：ＩｎｓｔｉｔｕｔｅｏｆＥｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔａｌＳｃｉｅｎｃｅ＆ＲｅｓｅａｒｃｈＬｉｍｉｔｅｄ，２００４．收稿日期：2012-08-06

（杨征武编校）

【卫生监测与检验】

乳及乳制品中舒巴坦敏感β-内酰胺酶类药物检验方法的建立

闫军１，遇晓杰１，薛成玉１，孟南希２，董锐１，谢平会１，郑晓华１，毕宇涵

关键词：乳制品；β－内酰胺酶；检测

１

中图分类号：R115文献标识码：B文章编号：1001-9561（2012）06-0820-02

本文参照国家食品安全风险评估中心培训的方法，采用对

青霉素类药物绝对敏感的标准菌株，利用舒巴坦特异性抑制β－内酰胺酶的活性，并加入青霉素作为对照，通过比对加入β－内酰胺酶抑制剂与未加入抑制剂的样品所产生的抑制圈的大小来间接测定样品是否含有β－内酰胺酶类药物，建立乳及乳制品中舒巴坦敏感β－内酰胺酶类药物的检验方法，分析检测过程中的具体步骤及注意事项。同时应用该方法对随机采集的乳头奶、原料奶及液态奶产品进行检测，掌握黑龙江省乳及乳制品中β－内酰胺酶类药物的残留情况，以便采取有效的控制措施，确保人民喝上放心奶。1材料和方法１．１材料

１．１．１样品来源２０１０年５－７月，严格遵照采样原则，选择黑龙江省具有代表性的不同规模的养殖场，在榨乳环节随机采集５２份乳头奶和１１５份原料奶样品；同时在黑龙江省大型超市采集不同品牌的液态奶产品５４份。

１．１．２标准菌株藤黄微球菌ＣＭＣＣ（Ｂ）２８００１（传代次数不得超过１４次）由国家医学菌种保藏管理中心提供。

１．１．３仪器及材料除微生物实验室常规灭菌及培养设备外，其他仪器及材料如下：抑菌圈测量尺、恒温培养箱（３６℃）、高压

无菌玻璃培养皿（具陶瓦盖）、无菌牛津杯（外径（８．０士灭菌器、

０．１）ｍｍ，内径（６．０士０．１）ｍｍ，高度（１０．０士０．１）ｍｍ）、麦氏比浊仪、ｐＨ计、无菌吸管、加样器（５～２０μＬ，２０～２００μＬ）。

作者单位：１黑龙江省疾病控制中心，哈尔滨１５００３０；２哈尔滨市疾病预

防控制中心

闫军（１９８２－），女，硕士研究生，从事微生物检验工作。作者单位：

通讯作者：遇晓杰

１．１．４培养基和试剂所用试剂均为分析纯，水为ＧＢ／Ｔ６６８２中

规定的三级水，由本实验室提供。青霉素、β－内酰胺酶和舒巴坦等标准物质均购自中国药品生物制品检定所，磷酸盐缓冲溶

营养琼脂、抗生素检测用培养基Ⅱ购自北京陆桥技术有限责液、任公司，加标实验的阴性纯奶样品购自某大型超市。１．２方法

１．２．１菌悬液的制备将藤黄微球菌接种于营养琼脂斜面上，经３６士１℃培养１８ｈ－２４ｈ，用灭菌棉签挑取新鲜菌落于磷酸盐缓冲液中，经麦氏比浊仪测定制成终浓度应大于１×１０１０ＣＦＵ／ｍＬ的菌悬液。

１．２．２加标样品的制备采用倍比稀释法将β－内酰胺酶标准物质稀释为４００Ｕ／ｍｌ、２００Ｕ／ｍｌ、８０Ｕ／ｍｌ、４０Ｕ／ｍｌ和２０Ｕ／ｍｌ5个浓度，分别取以上五个浓度的稀释液０．５ｍｌ加至９．５ｍｌβ－内酰胺酶阴性的纯奶之中，制成浓度分别为２０Ｕ／ｍｌ、１０Ｕ／ｍｌ、４Ｕ／ｍｌ、２Ｕ／ｍｌ、１Ｕ／ｍｌ浓度的阳性加标样品，同时用纯奶样品和磷酸盐缓冲液做对照。

１．２．３待检样品的制备将待检样品充分混匀，取１ｍＬ待检样品于１．５ｍＬ离心管中共４管，分别标为：Ａ、Ｂ、Ｃ、Ｄ，每个样品做三个平行，共１２管，同时每次检验应取磷酸盐缓冲液１ｍＬ加入到１．５ｍＬ离心管中作为阴性对照，取加标样品作为阳性对照。１．２．４检验用平板的制备取１２０ｍｍ灭菌玻璃培养皿，底层加１０ｍＬ灭菌的抗生素检测用培养基Ⅱ，凝固后上层加入５ｍＬ含有０．２ｍＬ藤黄微球菌的抗生素检测用培养基Ⅱ，立即放置四个牛津杯，凝固后备用。

１．２．５阳性加标样品的测定用磷酸盐缓冲溶液配置标准溶液：４００Ｕ／ｍｌ的β－内酰胺酶标准溶液、１ｍｇ／ｍＬ的舒巴坦标准溶液、０．１ｍｇ／ｍＬ的青霉素标准溶液。然后在放置于检验用平板上的