人前列腺素E2PGE2

使用说明书

产品编号：

本试剂盒仅供科研使用，不得用于临床及诊断使用！试剂组成

名称

包被平底微孔板

酶结合物

标准品

显色剂A

显色剂B

终止液

浓缩洗涤液（100倍

稀释）

使用说明书

自备物品

1.酶标仪（尽量提前预热）

2.微量加液器、吸头

3.蒸馏水或去离子水以及滤纸

操作步骤

1.取出试剂盒，于室温（20-25℃）放置15-30分钟。实验过程应在室温（20-25℃）内进行。2.取出酶标板，按照标准品的次序分别加入100μl的标准品溶液于空白微孔中。

3.空白微孔中加入100μl的样品，空白对照加入100μl的蒸馏水；

4.在各孔中加入50μl的酶标记溶液；（不含空白对照孔）

5.将酶标板用封口胶密封后，37℃孵育反应1小时；（在孵育箱中保持稳定的温度与湿度）6.充分清洗酶标板3-5次，保持各孔有充足的水压；（浓缩洗涤液以1：100的比例与蒸馏水稀释）7.酶标板洗涤后用吸水纸彻底拍干；

8.各孔加入显色剂A、B液各50μl；（不含空白对照孔）

9.20-25℃下避光反应15分钟；

10.各孔加入50μl终止液，终止反应；

结果判断

1.30分钟内在波长450nm的酶标仪上读取各孔的OD值；

2.百分结合率计算：设S0管计数为B0，各标准管或样品管计数为B，非特异管计数为NSB，则百分结合率计算公式如下：B/B0=(B－NSB)/(B0－NSB)×100%

3.logit计算:各标准点或样品管的logit值计算公式如下:logit=ln(B/B0)/(1－B/B0)

4.将标准品的OD均值与标准品0点的OD均相除，为标准点的百分结合率，在log-logit坐标纸上绘图。

5.Log-logit双对数标准曲线：坐标纸上横轴从左至右第一个1-9表示为第一个10进位，第二个1-9表示为第二个10进位。第三个1-9表示为第三个10进位。坐标纸纵轴为百分比（1-99），即各标准吸光值的百分结合率。取一条通过各点的直线。要求尽可能多的点在线上，同时剩余的点均匀分布在直线的两边。样品也同样由吸光值计算百分结合率，再从纵轴上的相应结合率找到直线上的点，此点对应的横坐标浓度即为样品的浓度，无须换算。

6.人工处理：以标准浓度取log值为横坐标，对应的logit值为纵坐标在普通坐标纸上或以标准浓度为横坐标，对应的B/B0为纵坐标在logit-log坐标纸上画出标准曲线（理想化时是一条直线）。根据待测样品的B/B0可以从坐标纸上查出样品的浓度值。如果使用普通坐标纸，查出的数值应取反对数才是最后的浓度值。

规格96孔6毫升1毫升6毫升6毫升6毫升10毫升数量1可拆卸板1瓶6瓶1瓶1瓶1瓶1瓶1份保存2-8℃密封冷藏2-8℃冷藏2-8℃冷藏2-8℃冷藏2-8℃避光冷藏2-8℃冷藏2-8℃冷藏