biology应用

食品与发酵工业FOODANDFERMENTATIONINDUSTRIES

Biolog微生物自动分析系统———细菌鉴定操作规程的研究

程　池　杨　梅　李金霞　姚　粟　胡海蓉

(中国食品发酵工业研究院中国工业微生物菌种保藏管理中心,北京,100027)

摘　要　Biolog微生物自动分析系统是美国Biolog公司研制开发的新型自动化快速微生物鉴定系统,以细菌对微平板上95种碳源的利用情况为基础从而进行微生物鉴定。目前我国已经累计引进100余台,但使用率较低。文中在总结实践经验的基础上,参阅最新Biolog系统操作手册412,研究制定了细菌鉴定的操作规程,以规范系统使用,获得准确鉴定结果,关键词　Biolog微生物自动分析系统,细菌鉴定,操作规程

　　,

鉴定系统阶段。近年来,一系列商品化自动鉴定系统相继推出并在应用中取得理想效果,如VITEK系统、MIDI系统、Biolog系统、SENSITITRE系统、AUTOSCEPTOR系统以及MICROSCAN系统等[1],其中细胞脂肪酸分析的MIDI系统、碳源利用分析的Biolog系统与DNA序列分析的16srRNA基因进化发育系统已经成为目前国际上细菌多相分类鉴定常用的技术手段[2～4]。

Biolog微生物自动分析系统是美国Biolog公司从1989年开始推出的一套微生物鉴定系统,最早进入商品化应用的是革兰氏阴性好氧细菌鉴定数据库(GN),其后陆续推出革兰氏阳性好氧细菌(GP)、酵母菌(YT)、厌氧细菌(AN)和丝状真菌(FF)鉴定数据库。Biolog系统6101版数据库共包括1973种微生物,其中细菌234个属,1226个种,与其他鉴定系统相比,其微生物种类的数据量较大,适合于环境、食品、工业、临床和动植物病原菌的鉴定分析。该系统于1991年获美国工业先进技术R&D奖,1994年美国已有200余台投入应用[5],1992年中科院微生物研究所引进了国内第1台Biolog系统[6],目前我国已经累计引进100余台,使用单位包括专业菌种保藏中心、大专院校和科研院所。近年来,一些大型制药或食品企业也相继引进该系统用于生产过程的微生物控制和产品微生物分析,如中美史克、华北制药、惠氏公司、燕京啤酒、青岛啤酒、张裕集团、五粮液集团、茅台集团、康师傅集团等。

第一作者:学士,教授级高级工程师。

收稿日期:2006-04-12

,我国Biolog系统的应用范围和程度远远不够,应用研究成果也较少[5～9],许多单位的设备长期闲置,造成资源的严重浪费。分析其原因可以发现,Biolog系统虽然具有操作简便,自动化程度高,鉴定快速,采用标准化程序和耗材等优点,但是,如果不配备具有一定专业背景的操作人员和科学适用的操作技术规程,准确使用该系统并得到正确的鉴定结果仍然具有一定难度。

中国工业微生物菌种保藏管理中心(CICC)承担了国家科技基础条件平台项目《工业微生物菌种资源标准化整理整合及共享试点》,负责对我国工业微生物资源进行标准化整理整合。CICC于2005年4月引进Biolog系统(Microstation412)以及全部5种鉴定数据库软件,在采用该系统进行大量微生物菌种复核和鉴定实验的基础上,根据Biolog系统操作手册412版[10]和国家微生物资源平台技术规程的统一格

式[11],研究制定了《Biolog微生物自动分析系统———细菌鉴定操作规程》,希望能够通过Biolog系统使用单位的试用和完善,形成标准化的技术操作规程,规范该系统在细菌鉴定中的操作应用,尽快提高我国Biolog系统的应用水平。

细菌鉴定操作规程的内容包括范围、术语和定义、原理、操作步骤以及附录。

1　范　围

本规程规定了Biolog微生物自动分析系统细菌鉴定的操作程序和方法。适用于Biolog微生物自动分析系统对革兰氏阴性细菌、革兰氏阳性细菌和厌氧细菌的鉴定。

2　术语和定义

下列术语和定义适用于本规程:

　50