酵母单杂交系统在植物抗渗透胁迫转录因子研究中的应用

中国生物工程杂志　ＣｈｉｎａＢｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，２００７，２７（９）：９１～９６

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王　琪　朱延明　王冬冬（东北农业大学生命科学学院　哈尔滨　１５００３０）

２］

ＨＢｓＡｂ）高度同源的蛋白［以及与人ε珠蛋白基因表（?３］达相关的基因［。然而，酵母单杂交系统在植物基因

综　　述

　　干旱、高盐和低温是严重影响作物生长发育及产量的３种不同形式的环境胁迫因子，是影响我国乃至世界农业生产的重大问题。因此，如何提高作物抗干旱、高盐和低温的能力是一个全世界范围内亟待解决的问题。近年来，植物学的研究已经从基因组时代转向到后基因组时代。植物基因组测序工程使得人们获得了大量的基因序列信息，但是这些基因的功能多数还是未知的。因此，现今更为重要的任务是将其研究重点转移到功能基因组和蛋白质组的研究上。　　酵母单杂交系统是一种识别能够稳定结合于ＤＮＡ上蛋白质的强有力方法，其突出特点是可在酵母细胞内研究真核细胞的ＤＮＡ—蛋白质之间的相互作用，并通过筛选ｃＤＮＡ文库直接得到与靶序列相互作用的蛋白质基因序列。自上个世纪九十年代问世以来

［１］

经被众多的研究者们广泛地应用于各个领域的科学研究中。该系统在医学和药学等领域的应用研究较早，我国学者在２００１年即得到了抗乙肝表面抗原抗体

收稿日期：２００７１１０７　　修回日期：２００７０６２０

３０５７０９９０），黑龙江省科技厅重点国家自然科学基金资助项目（

攻关资助项目（ＧＢ０５Ｂ１０４）电子信箱：ｙｍｚｈｕ２００１＠ｙａｈｏｏ．ｃｏｍ．ｃｎ通讯作者，

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酵母单杂交系统在植物抗渗透胁迫

转录因子研究中的应用

摘要　酵母单杂交系统是由酵母双杂交系统衍生来的研究ＤＮＡ与蛋白质之间相互作用的新型系统。系统阐述了单杂交系统的基本原理和技术路线，详细综述了其在植物抗渗透胁迫转录因子各个研究领域的应用进展，即克隆抗渗透胁迫类转录因子基因，确定已知ＤＮＡ蛋白质的相互作?用，定位已证实的具有相互作用的ＤＮＡ结合结构域以及验证转录激活作用。分析了当前该系统在植物抗渗透胁迫转录因子研究中存在的问题，进而对解决问题的途径进行了探讨。关键词　酵母单杂交系统　植物　渗透胁迫　转录因子　ＤＲＥＢ

中图分类号　Ｑ８１９

工程特别是转录因子基因工程中的研究起步较晚，目前的研究主要集中在转录因子基因的克隆等方面，与酵母单杂交系统相关的技术体系还不完善，有些学者利用该系统在植物中已经开展了研究工作。迄今为止，还未见有酵母单杂交系统在植物抗渗透胁迫转录因子研究应用方面的系统报道。

　　本文首先对酵母单杂交系统的原理和技术体系进行了系统总结，并全面地阐述了国内外利用该系统在植物抗渗透胁迫转录因子研究领域取得的进展。这将对于今后利用酵母单杂交技术进行植物抗逆功能基因组研究具有重要的指导意义和参考价值。

，已

１　酵母单杂交系统

１．１　酵母单杂交系统的原理

１，４］

　　酵母单杂交系统是Ｌｉ等［根据酵母双杂交技术

的原理提出的，用于研究ＤＮＡ—蛋白质之间的相互作用。其原理如下（图１）：

　　真核生物基因的转录起始需要转录因子的参与，转录因子通常由一个ＤＮＡ特异性结合功能域（ＤＮＡ?