薄层色谱
薄层色谱
薄层色谱又叫薄板层析,是色谱法中的一种,是快速分离和定性分析少量物质的一种很重要的实验技术,属固—液吸附色谱。
薄层色谱(Thin Layer Chromatography)常用TLC表示,又称薄层层析,属于固-液吸附色谱。是近年来发展起来的一种微量、快速而简单的色谱法。它兼备了柱色谱和纸色谱的优点,一方面适用于少量样品(几到几微克,甚至0.01微克)的分离;另一方面在制作薄层板时,把吸附层加厚加大,将样品点成一条线,则可分离多达500mg的样品。因此,又可用来精制样品,此法特别适用于挥发性较小或较高温度易发生变化而不能用气相色谱分析的物质。此外,在进行化学反应时,薄层色谱法还可用来跟踪有机反应及进行柱色谱之前的一种“预试”,常利用薄层色谱观察原料斑点的逐步消失来判断反应是否完成。
薄层色谱法的原理很简单,将固定相于玻璃等载板上,涂布成均匀的薄层,将被分离物质点在薄层的一端,至展开室中,展开剂(流动相)借毛细作用从薄层点样的一端展开到另一端,在此过程中不同物质可以得到分离,分离的原理随所用的固定相不同而异,可分为吸附薄层法,分配薄层法,离子交换薄层法以及凝胶薄层法等。
薄层色谱法的技术参数有保留值(比移值、高比移值、相对比移值、保留常数值、环形展开比移值),分配系数与容量因子,理论塔板数与塔板高度,分离度及分离数。
薄层色谱法的特点:设备简单,操作方便。只须一块玻璃板和一个层析缸。分析原理与经典柱上色谱相同、但是在敞开的薄层上可以检查混合物的成分是否分开可观察。快速,展开的时间短。比纸上色谱快速。一般纸上色谱需要几小时至几十小时薄层色谱一般只需十几分钟或几十分钟。使用无机吸附剂,薄层色谱可以采用腐蚀性的显色剂,如浓硫酸、浓盐酸和浓磷酸。对于特别难以检出的化合物,可以喷以浓硫酸,然后小心加热,使有机物碳化,显棕斑点,纸上色谱则无法检出。广泛地选用各种固定相,比纸上色谱有显著的灵活性。广泛地选用各流动相,比气相色谱灵活。 纸上色谱法斑点的扩散作用严重,降低了单位面积小样品的浓度,降低检出灵敏度。薄层色谱法扩散作用较少,斑点比较密集,检以灵敏度较高。薄层色谱法适于分析小量样品(一般儿到几十微克),也适于大量样品的分离(可以分离出几毫克甚至几十
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