有用

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2009No．11

SerialNo．212

ChinaBrewing

AnalysisandExamination

荧光法及化学发光法在保健食品抗氧化体外实验中的应用

文

镜，刘

璇，赵

建

（北京联合大学生物活性物质与功能食品北京市重点实验室，应用文理学院保健食品功能检测中心，北京100191）

摘要：保健食品体外抗氧化能力评价实验具有简便、快捷的特点。发射光谱法是目前常用的保健食品体外抗氧化能力检测方法。本

文对发射光谱法中的荧光法及化学发光法各自原理、特点、仪器、检测方法、应用范围进行了分析比较，并举例说明了这2种方法在保健食品抗氧化体外实验中的应用特点。关键

词：保健食品；抗氧化；体外实验；荧光法；化学发光法

文献标识码：A

文章编号：0254-5071（2009）11-0130-03

中图分类号：TS207.3

Applicationoffluorescenceandchemiluminescenceindeterminationofanti-oxidation

capabilityofhealthfoodinvitroexperiments

WENJing,LIUXuan,ZHAOJian

(BeijingKeyLaboratoryofBioactiveSubstancesandFunctionalFoods，CenterofFunctionalInspectionof

HealthFood，CollegeofArts&Science,BeijingUnionUniversity，Beijing100191,China)

Abstract:Thedeterminationexperimentofanti-oxidationcapabilityofhealthfoodinvitrowassimpleandeasy.Themethodofemissionspectrome-tryiscommonlyusedtoevaluatinghealthfoodanti-oxidationcapability.Theprinciples,characteristics,instruments,detectionmethodsandtheappli-cationsoffluorescenceandchemiluminescencemethodswerecomparedinthispaper.

Keywords:healthfood;anti-oxidation;invitro;fluorescence;chemiluminescence

近年来的研究证明，老化和各种生活习惯病的发生过程都与活性氧有关[1]。因此，抗氧化食品的研究和利用不仅成为当前保健食品研发的一个重点方向，而且受到人民群众的关注。而抗氧化功能评价方法的建立与正确运用就成为抗氧化保健食品研究中不可或缺的必要条件。

保健食品及其原料的体外抗氧化能力评价实验具有快捷的特点，适用于对大批量材料的筛选[2]、对不同简便、

样品抗氧化能力的比较[3]以及在保健食品抗氧化功能评价中对体内实验的补充[4]。国际上当前比较流行的几种天然产物体外抗氧化能力评价方法主要运用了吸收光谱法和发射光谱法。其中2，2′-连氮-双-（3-乙基苯并噻唑-6-磺酸）-二铵盐法（ABTS法）、1，1-二苯代苦基苯肼法（DDPH法）、铁离子还原﹨抗氧化能力测定法（FRAP法）等都属于吸收光谱法。而氧自由基吸收能力测定法（O-RAC法）和化学发光法（CL法）属于发射光谱法。这2种方法因其具有灵敏度高、选择性强、用样量少、方法简便、工作曲线线性范围宽等优点，不仅在保健食品研究领域得到应用，而且还广泛应用于生命科学、医学、药理学、有机和无机化学等领域[5]。1荧光与化学发光

当紫外光或波长较短的可见光照射到某些物质时，这些物质的分子吸收入射光后，经过10-9s~10-8s，能发射较长波长的光，而当光源停止照射时，这种光线随之消失。这种

收稿日期：2009-06-13

基金项目：北京市教委重点实验室引导基金项目（21202543503）作者简介：文

在激发光诱导下产生的光称为荧光，能发出荧光的物质称为荧光物质。荧光物质的原子、分子或离子接受外界能量，便由基态跃迁到激发态，先通过无辐射跃迁过渡到较低的激发态，再以发射跃迁的形式回到基态，由此产生的光谱称为荧光发射光谱。常见的有原子荧光发射光谱、分子荧光发射光谱[6]。

荧光是发射光，荧光物质经过光源激发后产生荧光，在有自由基如L-苯丙氨酸在激发光照射下产生较弱荧光，

的作用下能产生更强的荧光；罗丹明6G、丁基罗丹明B及人工合成的荧光素（SodiumFlurescein）等均能产生特征荧光。荧光法就是通过测定物质分子或原子产生的荧光进由行分析的方法。荧光分析可应用于物质的定性和定量，于物质的结构不同，所能吸收的紫外-可见光波长不同，所发射的荧光波长也不同，利用这个性质可以鉴别物质。对于同一种物质的稀溶液，其产生的荧光强度与浓度呈线性关系，利用这个性质可以定量测量[7-9]。

化学发光是在没有任何光、热或电能的激发下，只利用自身化学反应而产生的光辐射。化学发光分析就是利用化学反应所产生的发光现象对组份进行分析的方法。化学发光反应所发出的光强度决定于化学发光反应速度，而反应速度又决定于反应分子的浓度，因此通过检测化学发光强度可以直接测定反应物的浓度。通常情况下，发光强度与反应物分子浓度成正比，借助化学发光强度的测量，可以

），男，教授，主要从事保健食品功能学评价机理和方法学研究工作。镜（1952-