220大连水产学院学报　　　　　　　　　　　　第21卷

50%的H2SO41mL,再定容到1000mL。此溶液含磷100mg/L。

3)氮标准溶液　用纯水溶解014716g经110℃干燥1h的(NH4)2SO4,定容于1000mL。加入1mLCHCl3后贮存于棕色试剂瓶中,冰箱内(4℃)保存待用。此溶液含氨态氮100mg/L。

以纯水溶解113290g经110℃干燥1h的EDTA二钠(GR),定容于1000mL后贮存于棕色试剂瓶中,冰箱内(4℃)保存待用。此溶液含有机氮100mg/L。

4)硫酸钼酸铵锑贮备液　量取19416mL浓H2SO4,搅拌下缓缓加到405mL纯水中,搅拌均匀后,冷却。另称取钼酸铵20g溶于300mL纯水中,将上述冷却后的硫酸溶液缓缓加入其中,再加入100mL5g/L的酒石酸锑钾,混匀贮于棕色试剂瓶中备用。

5)钼-锑-抗显色剂　量取配制好的硫酸钼酸铵锑试剂100mL,加入115g抗坏血酸。此溶液不稳定,宜现用现配。

6)二氯化锡-甘油溶液　称取215g的SnCl2 2H2O,在温热搅拌下溶于100mL甘油中,溶液贮存于棕色试剂瓶中。可长期使用。

7)无氨海水　取自大连市长海县长山岛外海的表层海水,。11113　水样　采用8个不同水样分别用于回收率、精密度、下:水样Ⅰ含EDTA二钠2mg/L,水样Ⅱ含牛肉浸膏0水配制,用于消化温度、消化时间的影响试验;g/L,用纯水配制,水样Ⅳ含牛肉浸膏115116g/L,;水样Ⅴ为采自大连某地区的鱼塘水,水样Ⅵ(用纯水稀释5倍),水样Ⅶ为采自大连(4倍),水样Ⅷ、水样Ⅸ为大连水产学院苗种繁育基地的养殖污水,5、精密度、准确度等的测定。112　方法

11211　工作曲线　取6支25mL比色管,分别加入磷标准使用液(10mg/L)和氮标准使用液(10mg/L)各0、0180、1160、2140、3120、4100mL,用双蒸馏水定容至10mL,再分别加10mL消化

液,加盖摇匀后,放在高压灭菌锅内,于(125±1)℃下消化30min,冷却至室温,取出后定容至25mL。

TN测定　使用紫外可见分光光度计在波长220nm和275nm处分别测定吸光度。用ΔA(ΔA=A220nm-2A275nm,下同)对TN浓度做工作曲线。

TP测定　取消化定容后的溶液10mL,加钼-锑-抗显色剂110mL,摇匀后在20～40℃下显色30min,在700nm波长下比色。将吸光度对TP浓度做工作曲线。

TP标准溶液采用KH2PO4配制(未找到合适的标准有机磷化合物),TN标准溶液分别用EDTA二

钠(GR)和(NH4)2SO4(AR)配制。TP、TN标准溶液均同时用双蒸馏水和无氨海水稀释,以比较本方法对海水与淡水水样的适用性。11212　条件试验　为了搞清本方法操作条件对测定的影响,进行了消化剂用量、消化温度、消化时间、显色时间(发色曲线)、比色波长(吸收曲线)、水样消化以后的保存时间等条件试验。进行某一操作的条件试验时,除被试条件改变外,其余测定步骤均按照上述工作曲线的操作进行。11213　样品测定　用10mL待测样品代替10mL标准溶液,加入消化液10mL,摇匀后放入高压灭

菌锅中消化,其余操作同“11211”节。用ΔA对TN进行定量计算,另取消化、定容后的水样10mL,按照TP工作曲线操作步骤显色,测定TP。

2　结果与讨论

211　条件试验

(120±(125±21111　消化温度　取水样Ⅰ和水样Ⅱ,分别在(115±1)、1)、1)℃(接近蒸汽压力锅自

动放气的边界温度)3个温度下消化30min。试验在1周内重复进行2次,结果基本一致(图1)。