3-1实验八叶绿体中色素的提取和分离

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实验八叶绿体中色素的提取和分离

教学目的

1．初步掌握提取和分离叶绿体中色素的方法。

2．探索叶绿体中有几种色素。

实验原理

1．叶绿体中的色素能溶解在丙酮（有机溶剂，酒精、汽油、苯、石油醚等）中，所以用丙

酮可提取叶绿体中色素。

2．色素在层析液中溶解度不同，溶解度高的色素分子随层析液在滤纸条上的扩散得快，溶

解度低的色素分子随层析液在滤纸条上的扩散得慢，因而可用层析液将不同的色素分离。

实验程序

1）称取5g绿色叶片并剪碎

3-1实验八叶绿体中色素的提取和分离

）加入少量SiO

3-1实验八叶绿体中色素的提取和分离

2、CaCO3和5ml丙酮收集到试管内并塞紧管口

1）将干燥的滤纸剪成6cm长，1cm宽的纸条，剪去一端两角（使层析液同时

到达滤液细线）

2）在距剪角一端1cm处用铅笔画线

1）用毛细管吸少量的滤液沿铅笔线处小心均匀地划一条滤液细线

2）干燥后重复划2-3次

1）向烧杯中倒入3ml层析液（以层析液不没及滤液细线为准）

（2）将滤纸条尖端朝下略微斜靠烧杯内壁，轻轻插入层析液中

3）用培养皿盖盖上烧杯

最宽：叶绿素a；

最窄：叶绿素b；

相邻色素带最近：叶绿素a和叶绿素b；

相邻色素带最远：胡萝卜素和叶黄素。

实验关键

1．选材时应注意选择鲜嫩、色浓绿、无浆汁的叶片。如菠菜叶、棉花叶、洋槐叶等。

2．画滤液细线时，应以细、直、颜色浓绿为标准，重复画线时必须等上次画线干燥衙再进

行，重复2-3次。

3．层析时不要让滤液细线触及层析液。

注意事项

1．因丙酮和层析液都是易挥发且有一定毒性的有机溶剂，所以研磨要快，收集的滤液要用

棉塞塞住，层析时要加盖，尽量减少有机溶剂的挥发。

2．在研磨时要加少许二氧化硅，目的是为了研磨充分，有利于色素的提取；加少许碳酸钙

的目的是为了防止研磨过程中，叶绿体中的色素受到破坏。

3．分离色素时，一定不要让滤纸条上的滤液细线接触到层析液，这是因为色素易溶解在层

析液中，导致色素带不清晰，影响实验效果。

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