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研究论文（Articles）

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材料与仪器

仪器

美国Waters600高效液相色谱仪（带EmpowerPro工作

站）；Waters2487双波长检测器；在线真空脱气机；智能化柱温箱；TU-1810紫外可见分光光度计（北京普析通用仪器有限责任公司）；MettlerAB135-S型电子分析天平；KQ5200B型超声波清洗器。

（a）异槲皮苷对照品

1.2药材

阳春砂仁药材为2008-2009年市售。槲皮苷对照品（批

(a)isoquercitroside

号：111538-200403）购于中国医药生物制品检定所；异槲皮苷对照品购于天津市奎恩商贸有限公司，均为含量测定用。高效液相所用流动相甲醇为色谱纯，其余试剂为分析纯，水为纯净水。

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2.1

实验与结果

异槲皮苷、槲皮苷含量测定色谱条件选择

（b）槲皮苷对照品

(b)quercitroside

2.1.1

H＆EC18色谱柱（XPODS-A5μm120A250mm×4.6mm）；流动相为甲醇-水（含0.4%磷酸）44:56等度洗脱，流速

为1.0mL/min；紫外检测波长为350nm，柱温为30℃。

2.1.2供试样品溶液的制备

取粉碎后过60目筛的阳春砂仁粉末约2.0g，精密称定，置于100mL具塞三角瓶中，精密加入50mL甲醇，超声提取

1h，用甲醇补足减失重量。摇匀，过0.45μm微孔滤膜即得。2.1.3

对照品储备液的制备

（c）样品

分别取一定量异槲皮苷、槲皮苷对照品，精密称定，置于

25mL容量瓶中，用甲醇定容，制成质量浓度为0.122mg/mL

的异槲皮苷储备液和0.196mg/mL槲皮苷储备液。

图1

(c)Sample

高效液相色谱图谱

2.1.4对照品溶液的制备Fig.1ChromatogramofHPLC

注：A—异槲皮苷吸收峰；B—槲皮苷吸收峰

精密量取二者储备液各0.5mL，分别置于10mL容量瓶中，加甲醇定容至刻度，摇匀即得。

Notes:A—Absorptionpeakofisoquercitroside;

B—Absorptionpeakofquercitroside

2.1.5系统适用性

按2.1.1节中的色谱条件，分别取对照品溶液、供试品溶液10μL测定，结果见图1。结果两种被测组分分离效果均良好，且在同一条件下实现基线分离，理论塔板数按槲皮苷峰面积计算大于6000。

RSD为1.38%（n=6）；槲皮苷峰面积RSD为1.35%（n=6），表明

本方法精密度良好。

2.1.8稳定性

2.1.6线性关系

取2.1.2节中的药材供试品溶液，分别于制备后0、2、4、

精密吸取2.1.4节中的异槲皮苷、槲皮苷对照品溶液各6、8、10、12、24h进样，测定异槲皮苷、槲皮苷色谱峰面积，计

算RSD分别为0.99%和1.04%，表明药材供试液在24h基本稳定。

3、6、9、12、15μL注入液相色谱仪，测定峰面积。以对照品进

样量X（μg）为横坐标，色谱峰面积Y为纵坐标绘制标准曲线。计算异槲皮苷回归方程为Y=2297338.80X-2869.90，r=

2.1.9重现性

0.9997，进样量在0.0183~0.0915范围内有良好的线性关系；

槲皮苷的回归方程为Y=2203435.37X+1431.80，r=0.9997，进样量在0.0294~0.147μg范围内线性关系良好。

取同一批次的砂仁药材，按照2.1.2节方法制备为供试液，平行操作制备6份。进样10μL测定，计算异槲皮苷、槲皮苷的平均含量分别为0.00219mg/g，RSD=1.03%（n=6）和

2.1.7精密度0.00859mg/g，RSD=0.87%（n=6）。表明本方法重现性良好。2.1.10

回收率

取同一批次已测知含量的砂仁药材约1.0g，精密称定，

2009，27（9）

取2.1.2节中的药材供试品溶液，重复进样6次，测定异槲皮苷、槲皮苷的色谱峰面积。结果显示，异槲皮苷峰面积

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