realtimePCR和RT-PCR详解及其区别

realtimePCR和RT-PCR详解及其区别

real-time PCR技术的原理及应用 摘要:一、实时荧光定量PCR原理 (一)定义:在PCR反应体系中加入荧光基团,利用荧光信号累积实时监测整个PCR进程,最后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法 。 (二)实时原理

1、常规PCR技术: 对PCR扩增反应的终点产物进行定量和定性分析无法对起始模板准

一、实时荧光定量PCR原理

(一)定义:在PCR反应体系中加入荧光基团,利用荧光信号累

积实时监测整个PCR进程,最后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法 。

(二)实时原理

1、常规PCR技术:

对PCR扩增反应的终点产物进行定量和定性分析无法对起始模

板准确定量,无法对扩增反应实时检测。

2、实时定量PCR技术:

利用荧光信号的变化实时检测PCR扩增反应中每一个循环扩增

产物量的变化,通过Ct值和标准曲线的分析对起始模板进行定量分析

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