奶制品中蛋白质 ,钙铁锌的测定

全面

方法一 : 紫外分光光度计法

1)实验原理

蛋白质及其降解产物(月示 、胨、肽和氨基酸)的芳香环残基(酪氨酸和色氨酸)在紫外光区对 =280nm波长的紫外光具有选择性吸收作用。在此波长下,牛乳样液对紫外光的吸收程度与其蛋白质浓度(3~8 mg/ml)成线性关系,因此,通过测定牛乳蛋白质溶液吸光度A,查阅事先用凯氏定氮法测定蛋白质含量的标准牛乳样品所作的标准曲线,即可求出待测样品中蛋白质含量。

2)主要试剂和仪器

1.试剂—97%冰醋酸

标准牛乳样品(已采用K氏定氮法测定出蛋白质含量)

2.仪器—紫外吸收光谱分析仪器(UV2550型,附石英比色皿,日本岛津) 25ml具塞比色管

3)测定

1.标准曲线制备

分别吸取已经K氏定氮法测定出蛋白质含量的标准牛乳样液0.0,0.1,0.2,0.3,0.4,0.5ml于六个25ml具塞比色管(含蛋白质3~10mg) 各用97%冰醋酸溶液定容至刻度 摇匀 入1cm石英比色皿 于 280nm下测吸光度A(97%冰醋酸溶液参比) 绘制A~c标准曲线。

2.样品测定

准确取待测牛乳样液0.3ml 入25ml具塞比色管中 用97%冰醋酸溶液定容至刻度 同上测定样液吸光度A 在A~c标准曲线上查出蛋白质浓度c 求出蛋白质含量(%)

4)计算

c蛋白质 ml牛乳 100V 1000

式中 c —从标准曲线上查得的蛋白质mg数

V—待测牛乳样液体积,ml

方法二: 凯氏定氮法

实验原理:◆蛋白质的含氮量较恒定,一般为 16%,上下略有浮动

◆N/16%=N*6.25=蛋白质的含量

◆样品与浓硫酸和催化剂一同加热消化,使蛋白质分解,其中碳

和氢被氧化为二氧化碳和水逸出,而样品中的有机氮转化为氨

与硫酸结合成硫酸铵。然后加碱蒸馏,使氨蒸出,用硼酸吸收,

再以标准盐酸溶液滴定,测出释放的氨含量,并计算氮素含量,

再乘以6.25即为蛋白质的含量。

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